Struktur von Nickel/Cobalt-Permeasen (NiCoT; TC 2.A.52)
Projektbeschreibung
Nickel/Cobalt Transporter (NiCoT, TC 2.A.52) vermitteln die hochaffine Aufnahme von Ni2+ and Co2+ -Ionen in vielen Prokaryoten und manchen Pilzen. Verwandte Proteine mit auffälliger Sequenzähnlichkeit sind in Pflanzen weit verbreitet. Das Ziel des vorgestellten Projekts ist die Aufklärung der molekularen Grundlagen der selektiven Metallerkennung und des selektiven -transports durch NiCoTs. Dieses Ziel soll durch kristallografische und biophysikalische Experimente erreicht werden. In der ersten Antragsperiode wurden die experimentellen Grundlagen ausgearbeitet, um NiCoTs im präparativen Maßstab zu reinigen; erste 2D- und 3D-Kristallisationsansätze lieferten erfolgversprechende Ergebnisse. Der Schwerpunkt der folgenden Periode wird auf der Optimierung der Kristallisationsbedingungen liegen, mit der Zielsetzung, Kristalle von NiCoTs zu erzeugen, die für Röntgenbeugungsanalysen geignet sind, und ein dreidimensionales Strukturmodell in vernünftiger Auflösung zu erhalten. Durch die Kombination von ortsspezifischer Mutagenese mit verschiedenen spektroskopischen Verfahren soll versucht werden, die metallbindenden Liganden in NiCoTs zu identifizieren. Ähnliche Vorgehensweisen sind geplant, um kürzlich identifizierte mögliche Ni2+ and Co2+-Transporter der Äußeren Membran verschiedener gramnegativer Bakterien zu charakterisieren.
Projektleitung
Mittelgeber
DFG Sachbeihilfe
Laufzeit
Projektstart: 05/2007
Projektende: 06/2010
