Self-purifying Fmoc-solid-phase synthesis of C-terminal peptidethioesters

C-terminale Peptidthioester sind wertvolle Bausteine in der chemischen Totalsynthese von Proteinen, beispielsweise in der Native Chemical Ligation. Eine automatisierte Fmoc-Festphasensynthese von Peptidthioestern ist derzeit nur unter Inkaufnahme von Nebenreaktionen anwendbar. Es ist das Ziel, eine selbstreinigende Methode zur Fmoc-Festphasensynthese von Peptidthioestern zu entwickeln, um auf die Anwendung zeitaufwendiger HPLC-Reinigungen verzichten zu können. Dies sollte die Anwendung der Native Chemical Ligation in der chemischen Synthese von Protein-Arrays befördern. Die neue Methode wird eine Abfolge von Cyclisierungs- und Ringöffnungsreaktionen beinhalten. Ein nach Abschluss der linearen Festphasensynthese eingeführter Cyclisierungslinker vermittelt eine Reaktion mit einer Carboxylgruppe, die zuvor im Zuge der Alkylierung einer N-Acylsulfonamidlinkerstruktur eingebracht wurde. Der Angriff eines Thiols an das aktivierte Acylsulfonimid öffnet den Macrocyclus unter Entstehung eines polymergebunden Peptid-thioester. Acetylierte Abbruchsequenzen sind von der Einführung des Cyclisierungslinkers und damit von der Macro-cyclisierung ausgenommen und werden in die Lösung entlassen und entfernt. Eine nachfolgende saure Spaltung des Cyclisierungslinkers setzt die reinen Peptidthioester frei, die in der Synthese von Protein-Arrays verwendet werden.